細(xì)胞培養(yǎng)的無(wú)菌環(huán)境-無(wú)菌室和超凈工作臺(tái)

更新時(shí)間：2022-06-07 | 點(diǎn)擊率：1385

一、無(wú)菌室

無(wú)菌室的結(jié)構(gòu)：一般由更衣間、緩沖間、操作間三部分組成。

無(wú)菌室的消毒和防污染：為保持無(wú)菌狀態(tài)，經(jīng)常消毒是必要的，通常采用每日（使用前）紫外照射（1－2小時(shí)），每周甲醛、乳酸、過(guò)氧乙酸熏蒸（2小時(shí)）和每月新潔爾滅擦拭地面和墻壁一次的方式進(jìn)行消毒。實(shí)際工作中，要根據(jù)無(wú)菌室建筑材料的差異來(lái)選擇合適的消毒方法。

此外，還應(yīng)注意防止無(wú)菌室的污染。造成無(wú)菌室污染的可能包括：送入無(wú)菌室的風(fēng)沒(méi)有被過(guò)濾除菌；進(jìn)出無(wú)菌室時(shí)，能使外界空氣直接對(duì)流進(jìn)無(wú)菌室的操作間；等。

二、超凈工作臺(tái)

工作原理：鼓風(fēng)機(jī)驅(qū)動(dòng)空氣通過(guò)高效過(guò)濾器得以凈化，凈化的空氣被徐徐吹過(guò)臺(tái)面空間而將其中的塵埃、細(xì)菌甚至病毒顆粒帶走，使工作區(qū)構(gòu)成無(wú)菌環(huán)境。根據(jù)氣流在超凈工作臺(tái)的流動(dòng)方向不同，可將超凈工作臺(tái)分為側(cè)流式、直流式和外流式三種類型。

超凈臺(tái)的使用與保養(yǎng)：超凈臺(tái)的平均風(fēng)速保持在0.32-0.48米/秒為宜，過(guò)大、過(guò)小均不利于保持凈化度；使用前最好開(kāi)啟超凈臺(tái)內(nèi)紫外燈照射10－30分鐘，然后讓超凈臺(tái)預(yù)工作10－15分鐘，以除去臭氧和使用工作臺(tái)面空間呈凈化狀態(tài)；使用完畢后，要用70%酒精將臺(tái)面和臺(tái)內(nèi)四周擦拭干凈，以保證超凈臺(tái)無(wú)菌。還要定期用福爾馬林熏蒸超凈臺(tái)。

細(xì)胞間發(fā)生支原體污染的風(fēng)險(xiǎn)較高，因?yàn)槿恕⒃噭⒓?xì)胞株都可攜帶支原體。下面，筆者從預(yù)防的角度，對(duì)降低支原體污染風(fēng)險(xiǎn)提供一些建議，供參考。

1. 預(yù)防人源攜帶的支原體

1）應(yīng)帶帽子、口罩、手套、白大褂，應(yīng)預(yù)防個(gè)人攜帶的支原體飄散到空氣中，同時(shí)應(yīng)注意個(gè)人衛(wèi)生。

2）在超凈臺(tái)上操作，必要時(shí)打開(kāi)酒精燈。

3）操作時(shí)盡量不說(shuō)話。

2. 預(yù)防環(huán)境中的支原體

可使用德國(guó)MB公司的支原體祛除噴霧Mycoplasma Off™或濕巾Mycoplasma Off™ Wipe。該祛除劑中含有殺滅支原體的Mynox®成分。也能消除細(xì)菌、真菌和一些病毒。應(yīng)定期對(duì)環(huán)境進(jìn)行清潔消毒。