在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%，因而細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中被支原體污染是一個(gè)世界性的難題。細(xì)胞培養(yǎng)中常遇見的有細(xì)菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說(shuō)起支原體污染，估計(jì)細(xì)胞培養(yǎng)的同學(xué)就開始犯愁了，細(xì)胞培養(yǎng)的老手都知道，支原體污染非常不易察覺。有的實(shí)驗(yàn)室被支原體污染后，如果不進(jìn)行有效*的支原體清除，該實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞培養(yǎng)很難進(jìn)行下去，細(xì)胞傳代3代以后狀態(tài)就急劇下滑，無(wú)法進(jìn)行正常實(shí)驗(yàn)，有的實(shí)驗(yàn)室甚至只能指望換細(xì)胞間。那么怎樣才能有效檢測(cè)并清除支原體污染呢?

支原體污染的來(lái)源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染（一些支原體在人體是正常菌群）、培養(yǎng)的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染和用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來(lái)預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染；嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)和器材要保證無(wú)菌；在細(xì)胞培養(yǎng)中加入適量的抗生素。

如果受到支原體污染時(shí)，細(xì)胞形態(tài)較之無(wú)明顯變化，極易被忽視，往往直到污染非常嚴(yán)重時(shí)才能發(fā)現(xiàn)。受污染的細(xì)胞膜上可能有幾百個(gè)支原體，這些支原體競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)并釋放有毒的代謝產(chǎn)物，嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

對(duì)于費(fèi)力擴(kuò)增的細(xì)胞（如已轉(zhuǎn)染，或經(jīng)過(guò)體外刺激），如果細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有支原體污染，但此細(xì)胞又不愿丟棄，希望繼續(xù)培養(yǎng)，推薦使用MB公司生產(chǎn)的專li復(fù)合抗生素Zell Shield®。

注意：

①每次使用Zell Shield®之前，務(wù)必先用廠家推薦的“懸浮沖洗法"處理細(xì)胞，這樣才能達(dá)到最佳的支原體祛除效果。

②在祛除細(xì)胞支原體污染的過(guò)程中，需要環(huán)境、試劑及耗材確保潔凈，無(wú)新的支原體污染加入。只要如法操作，在使用Zell Shield®四代后，細(xì)胞中的支原體即可祛除。

特點(diǎn)

1) 高效廣譜。Zell Shield®通過(guò)阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過(guò)程中DNA及蛋白的合成，有效抑制上述微生物的增殖。

2) 安全。無(wú)細(xì)胞毒性，專li復(fù)合支原體敏感抗生素，對(duì)大多數(shù)細(xì)胞株無(wú)毒。

3) 活性穩(wěn)定。在細(xì)胞培養(yǎng)期間，Zell Shield®始終保持穩(wěn)定的活性。

4) 使用方便。Zell Shield®為無(wú)菌溶液，可直接加入培養(yǎng)基使用。

用法

1) 在每次使用Zell Shield®之前，細(xì)胞傳代時(shí)，先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法"處理好細(xì)胞，再使用加了Zell Shield®的培養(yǎng)基養(yǎng)細(xì)胞，能達(dá)到最佳的祛除支原體的效果。（“懸浮沖洗法"的詳細(xì)步驟，見下一頁(yè)）

2) Zell Shield®常規(guī)為-18℃保存，建議使用前，先融化分裝，仍舊-18℃避光保存，使用時(shí)按需融化配置。避免反復(fù)凍融。

3) Zell Shield®按1:100濃度可直接加入培養(yǎng)基。例如：500ml培養(yǎng)基中添加5ml Zell Shield®，50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培養(yǎng)基使用。