病毒通過(guò)將其DNA注入宿主細(xì)胞來(lái)繁殖。一旦進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)液，這種異物就會(huì)觸發(fā)一種稱(chēng)為cGAS-STING途徑的防御機(jī)制。蛋白質(zhì)環(huán)狀GMP-AMP合酶(cGAS)也存在于液體中，它與入侵的DNA結(jié)合形成一個(gè)新分子。反過(guò)來(lái)，它與另一種稱(chēng)為干擾素基因刺激物(STING)的蛋白質(zhì)結(jié)合，從而誘導(dǎo)炎癥性免疫反應(yīng)。

有時(shí)，流體中包含的與cGAS蛋白接觸的物質(zhì)不是來(lái)自病毒，而是來(lái)自細(xì)胞本身，例如在細(xì)胞核意外破裂后。發(fā)生這種情況時(shí)，不會(huì)激活cGAS-STING路徑。EPFL的科學(xué)家證明了細(xì)胞如何能夠?qū)ψ陨淼腄NA和病原體的遺傳物質(zhì)做出不同的反應(yīng)-并避免攻擊錯(cuò)誤的靶標(biāo)。他們的發(fā)現(xiàn)發(fā)表在《科學(xué)》雜志上的一篇論文中，為人體炎癥反應(yīng)中的復(fù)雜過(guò)程提供了新的思路。

由安德里亞·阿布拉斯瑟(Andrea Ablasser)教授領(lǐng)導(dǎo)的團(tuán)隊(duì)與Beat Beaterer教授和塞爾曼·薩卡(Selman Sakar)教授實(shí)驗(yàn)室的同事合作，發(fā)現(xiàn)了一種新的洞察力，發(fā)現(xiàn)了一種稱(chēng)為“自體障礙自動(dòng)整合因子”(BAF)的小蛋白質(zhì)的關(guān)鍵作用。他們表明，BAF通過(guò)與無(wú)攻擊性DNA結(jié)合，阻止cGAS蛋白發(fā)揮作用，從而阻止了cGAS-STING途徑的蹤跡。

BAF增強(qiáng)細(xì)胞核，將核被膜(或膜)連接到內(nèi)部DNA。實(shí)驗(yàn)表明，當(dāng)這種蛋白質(zhì)從實(shí)驗(yàn)室生長(zhǎng)的細(xì)胞中去除后，細(xì)胞核就會(huì)破裂。這種破壞將遺傳物質(zhì)釋放到細(xì)胞內(nèi)液中，在那里它與cGAS蛋白接觸并觸發(fā)cGAS-STING途徑-就像它是外源DNA一樣。

有多種方法可以使核破裂，例如通過(guò)施加機(jī)械壓力。但是，據(jù)該論文的主要作者之一巴蒂斯特·蓋伊(Baptiste Guey)所說(shuō)，只有一種方法-去除BAF蛋白-會(huì)誘導(dǎo)免疫反應(yīng)。Guey說(shuō)：“因此，我們可以得出結(jié)論，BAF在防止細(xì)胞攻擊其自身DNA方面起著關(guān)鍵作用。”

蛋白質(zhì)的抑制劑作用至關(guān)重要：盡管cGAS-STING途徑有助于機(jī)體抵抗感染，但也需要加以控制。該論文的另一位主要作者瑪麗蓮娜·維施紐斯基說(shuō)：“核仁偶爾會(huì)破裂，但細(xì)胞能夠修復(fù)損傷。”“如果cGAS每次發(fā)生都與DNA結(jié)合，后果將更加嚴(yán)重。”

在Aicardi-Goutières綜合征中可以看到過(guò)度活躍的cGAS-STING途徑的危險(xiǎn)：這是一種罕見(jiàn)的且通常是致命的遺傳性疾病，可引起過(guò)度的炎癥反應(yīng)，就像人體細(xì)胞不斷受到入侵病原體的攻擊一樣。

還認(rèn)為BAF在某些類(lèi)型的腫瘤中起作用。根據(jù)Wischnewski所說(shuō)，癌細(xì)胞中蛋白質(zhì)的高濃度可能與預(yù)后不良有關(guān)。她解釋說(shuō)：“可能BAF使腫瘤更具抵抗力。”“通過(guò)阻止cGAS-STING途徑的激活，它可能使癌細(xì)胞逃避人體的免疫系統(tǒng)。”

來(lái)源：生物幫

 

有下列情況者，對(duì)血清內(nèi)毒素應(yīng)格外留意篩選：

1.養(yǎng)干細(xì)胞時(shí)，干細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素非常敏感，如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時(shí)，干細(xì)胞很容易死亡。很多使用者，在血清在試用前，就通過(guò)提早審核該批次《檢測(cè)報(bào)告》，以決定是否入圍進(jìn)行試用。

2.養(yǎng)免疫細(xì)胞時(shí)，過(guò)高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子，抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。

3.基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài)，任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑，都會(huì)讓后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果“失之毫厘，謬以千里”。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時(shí)，選擇極低的內(nèi)毒素（≤1EU/ml），對(duì)實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要；

4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細(xì)胞轉(zhuǎn)染，或者肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細(xì)胞的擴(kuò)增，這些都需要挑選好的血清給細(xì)胞以有力支持。因此，挑選更低的內(nèi)毒素，是保證實(shí)驗(yàn)順利的首步。

5.實(shí)驗(yàn)室有些細(xì)胞，需要長(zhǎng)期培養(yǎng)、長(zhǎng)期凍存，或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的，血清會(huì)經(jīng)常或長(zhǎng)時(shí)間作用于細(xì)胞。為保證細(xì)胞的健康，都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清，以避免內(nèi)毒素長(zhǎng)久對(duì)細(xì)胞的毒性影響。

總之，血清中內(nèi)毒素含量過(guò)高，更容易導(dǎo)致細(xì)胞“亞健康”，造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn)，或細(xì)胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡，導(dǎo)致試驗(yàn)中斷失敗。血清中的內(nèi)毒素越低越好。

細(xì)胞培養(yǎng)學(xué)會(huì)均依據(jù)內(nèi)毒素對(duì)血清的品質(zhì)進(jìn)行分級(jí)和命名。

內(nèi)毒素含量越低的血清，級(jí)別就越高，以胎牛血清為例：

當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時(shí)，此血清為特級(jí)胎牛血清；

當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時(shí)，此血清為優(yōu)級(jí)胎牛血清；

當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時(shí)，此血清為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清；

目前，由于同一廠家，不同批次的血清，內(nèi)毒素?cái)?shù)值也可能有較大差異，因此很多血清廠家在名稱(chēng)上已不注明級(jí)別。但使用者仍可通過(guò)檢測(cè)報(bào)告，自行甄別挑選。）