支原體污染不僅是細胞培養(yǎng)中需要克服的現(xiàn)象，而且是制藥、生物制品生產(chǎn)中需要加以避免的。

圖：電鏡下的支原體

對于藥品和生物制品，出廠前基本都需要做支原體檢驗。在這方面，《中國藥典》有詳細的規(guī)定。有些獸用疫苗出廠前也需要做支原體檢驗，可參考《中國獸藥典》。

對于細胞培養(yǎng)的實驗室，建議應(yīng)定期進行支原體污染存在與否的常規(guī)監(jiān)測。原因有四：

1、支原體污染肉眼不易分辨。支原體只有電鏡下才能觀察到，早期的支原體感染沒有很明顯的特征。

2、細胞極易發(fā)生支原體污染。據(jù)對多個研究機構(gòu)的實驗室調(diào)查顯示，細胞培養(yǎng)時，支原體污染的發(fā)生率平均在60%以上。常規(guī)抗生素無法抑制支原體。支原體可來自環(huán)境、人的口腔、鼻咽、胰酶或者培養(yǎng)基。細胞間內(nèi)有一瓶細胞污染，其支原體極易通過氣溶膠造成傳播。

3、支原體對實驗干擾大。支原體可造成細胞的染色體斷裂和蛋白表達譜變化，爭奪細胞的營養(yǎng)，使實驗數(shù)據(jù)的可信度下降。

4、支原體檢測較為方便。現(xiàn)在吸取200ml細胞培養(yǎng)上清，采用PCR的方法，只需不到3個小時即可出結(jié)果。

 建議選用特異性強、靈敏度高、檢測支原體種類較多、省時省力的PCR試劑盒，比如德國Minerva公司出品、羅伯特·科赫研究所監(jiān)制的，其有檢測試劑盒共有四款（其中一款為熒光定量法）可加以選用，其中兩款適合工業(yè)用戶，已通過歐洲藥典認證。其支原體檢測的配套產(chǎn)品也很豐富，例如支原體DNA提取試劑盒（非必選），支原體標準品等，

也許有人會說，我培養(yǎng)的細胞一直都長的很好，形態(tài)正常，或者說，我已經(jīng)用了預防支原體的產(chǎn)品，我不需要作支原體檢測。但如果細胞長得不好，也沒有用支原體預防劑或者有如下情況時，則強烈建議進行支原體檢測。

1、實驗室里帶進來新細胞。新細胞是支原體污染的主要來源。在新細胞作任何用途之前，有必要隔離細胞，并檢查是否有支原體污染。

2、實驗室里近發(fā)生過支原體污染。

3、細胞將要凍存之前，建議進行支原體檢測。因為支原體的存在，會導致液氮罐中支原體污染的傳播。