簡述無血清培養(yǎng)基的優(yōu)缺點

更新時間：2018-12-11 | 點擊率：1758

近年來，隨著生物醫(yī)藥技術(shù)的快速發(fā)展，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、商業(yè)應(yīng)用和生物制品等多個領(lǐng)域。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于分離、增殖和鑒定病毒，也適用于篩選抗癌藥物和對有毒物質(zhì)進行檢測等方面的研究。

可以利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進行大規(guī)模生物制品研發(fā)，如單克隆抗體、疫苗及重組蛋白的制備、藥物開發(fā)、干細(xì)胞移植、人造器官培養(yǎng)等。因此，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已成為科學(xué)研究和醫(yī)藥制品開發(fā)的關(guān)鍵因素之一。

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中使用的培養(yǎng)基主要包括合成細(xì)胞培養(yǎng)基和天然細(xì)胞培養(yǎng)基，其中應(yīng)用廣泛的是天然培養(yǎng)基。血清是一種在體外培養(yǎng)細(xì)胞時加入的物質(zhì)，它是在血漿中去除纖維蛋白原而分離出的一種成分十分復(fù)雜的混合物，用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清。

血清中富含細(xì)胞生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì)，在細(xì)胞培養(yǎng)過程中具有重要作用但實際生產(chǎn)中血清提取工藝復(fù)雜，成本高昂，給大規(guī)模生產(chǎn)帶來困難，不利于商業(yè)化開發(fā)，且血清成分復(fù)雜，無法有效質(zhì)控，常見細(xì)胞源疫苗血清殘留對疫苗免疫效果有很大的影響。

疫苗生產(chǎn)多采用M199、DMEM、MEM等培養(yǎng)基加新生牛血清的方式，但由于血清成分的復(fù)雜性和不確定性，疫苗生產(chǎn)企業(yè)期待新型無血清培養(yǎng)基的上市。近年來，市面上出現(xiàn)了無血清培養(yǎng)基。無血清培養(yǎng)已成為包括疫苗在內(nèi)的生物技術(shù)藥物生產(chǎn)的總趨勢。由于無血清培養(yǎng)基可*采用已知分子結(jié)構(gòu)或構(gòu)型組分的低蛋白, 甚至*不采用蛋白組分, 因此被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞工程領(lǐng)域。

締一生物為您介紹一款可無血清培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)基，由上HiMedia公司生產(chǎn)M199改良型——SFRE 199細(xì)胞培養(yǎng)基。SFRE 199分為I型和II型，即SFRE 199-1和SFRE 199-2。開始研發(fā)是為了生長和維持培養(yǎng)Bak細(xì)胞（原代狒狒腎細(xì)胞）。

SFRE-199將M199標(biāo)準(zhǔn)配方中的精氨酸增加到150mg/L，半胱氨酸增至4mg/L，胱氨酸增至40mg/L，谷氨酰胺增至300mg/L，谷氨酸增至75mg/L，甘氨酸增至100mg/l，組氨酸增至40mg/L，酪氨酸增至80mg/L，以獲得較好的細(xì)胞生長而未表現(xiàn)出毒性。另外，還降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。SFRE 199-1與SFRE 199-2的不同在于，前者含有Hank's鹽，而后者所含為Earle's鹽。與加胎牛血清的常規(guī)培養(yǎng)基比較，細(xì)胞生長速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同。均在移植后第6天單層細(xì)胞達到充分融合。

有報道，在SFRE 199-1生長的原代Bak細(xì)胞的群體二倍分裂時間(PDT)約為34.2小時，與加有5%牛血清的HLH(含水解乳白蛋白的HBSS)相同，加有3%胎牛血清的M199的PDT為36小時。如果在SFRE 199-1中去除胰島素或硫酸鋅，則細(xì)胞不能融合，PDT延長。若含有胰島素和硫酸鋅，則其支持生長的能力相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)對照血清培養(yǎng)基。

近年來，無血清培養(yǎng)基的應(yīng)用越來越廣泛，但也各有利弊，本文締一生物為您介紹無血清培養(yǎng)基的主要優(yōu)缺點：

優(yōu)點：

①無血清培養(yǎng)基不含血清，提高了實驗的重復(fù)性、準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性；

②避免了血清所帶來的血源性污染等問題，減少血清未知成分對細(xì)胞的損傷；

③無血清培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)來源于重組蛋白或蛋白水解產(chǎn)物，提高了實驗效率；

④無血清培養(yǎng)基的成分和含量相對明確，能提高細(xì)胞產(chǎn)品的質(zhì)量并有利于產(chǎn)物的分離提純；⑤無血清培養(yǎng)基在生物醫(yī)藥等領(lǐng)域有著極大的應(yīng)用潛能；

⑥制備流程簡易，操作簡單。

缺點：

①無血清培養(yǎng)基的生產(chǎn)成本較高，不利于商業(yè)化開發(fā)與應(yīng)用；

②目前低血清培養(yǎng)基研究開發(fā)的相關(guān)數(shù)據(jù)缺乏在線交流，可查閱的資料有限，不能有效促進細(xì)胞馴化技術(shù)的發(fā)展；

③多數(shù)無血清培養(yǎng)基的應(yīng)用不廣泛，通用性較低，不具有普遍性；

④細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中，對外界條件如物理和化學(xué)等因素的改變較敏感。